• laboratorij-217043_1280

Metoda odstranjevanja ostankov celic

Po mehanski lizi celične suspenzije je veliko celičnih fragmentov.Kako odstraniti te drobce?Oglejmo si različne pristope:

1. Uporabite metodo redčenja.Ko se celice razredčijo, se lahko tudi razmnožijo, čedalje več jih bo, celičnih ostankov pa bo temu primerno vse manj.
2. Obstaja tudi naravna poselitev.Celice se usedejo hitreje kot večina drobcev: : Celično suspenzijo premaknite vcentrifugalna cev, in ko večina celic potone, lahko zgornjo raztopino odsesamo in nato dodamo raztopini kulture, da suspendiramo celice.To metodo lahko uporabljate večkrat, vsakič pa lahko pod mikroskopom opazujete, ali ustreza vašim zahtevam.
3. Centrifuga z nizko hitrostjolahko odstrani ostanke, običajno 700 g, 5 min
4. Pri centrifugiranju, pod pogojem, da je število celic zadostno, zmanjšajte čas centrifugiranja, na primer 5min, 1000rpm, namesto 3min, 1000rpm, in odstranite supernatant, ker so nekroze in ostanki na splošno v supernatantu!Ta postopek je treba izvesti samo enkrat med postopkom pranja pred inkubacijo!

Čeprav obstaja veliko načinov za odstranjevanje celičnih ostankov, boste ugotovili, da je centrifugiranje ena najučinkovitejših metod!

450

In ker imajo rastlinska tkiva in celice celične stene, sestavljene iz celuloze, hemiceluloze in pektina, je za dosego namena na splošno treba zdrobiti kremenčev pesek ali stekleni prah z ustrezno ekstrakcijsko raztopino ali obdelati s celulazo.Fragmentacija bakterijske celice je težja, ker je celoten skelet bakterijske celične stene pravzaprav kovalentna vez peptidoglikanskih cističnih makromolekul, ki je zelo trda.Običajne metode lomljenja bakterijskih celičnih sten vključujejo ultrazvočno drobljenje, mletje peska, visokotlačno ekstruzijo ali obdelavo z lizocimom.Ko se tkivo in celice razbijejo, se izbere ustrezen pufer za ekstrakcijo želenega proteina.Netopne snovi, kot so delci celic, se odstranijo zcentrifugaali filtracijo.

kontaktirajte Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Čas objave: 24. julij 2023